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上海信帆:結(jié)締組織染色的方法和步驟

更新時(shí)間:2015-08-27      瀏覽次數(shù):1641

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一般所說(shuō)的結(jié)締組織是指纖維性結(jié)締組織而言,其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是細(xì)胞間質(zhì)內(nèi)基質(zhì)外含有較多的纖維成分,主要是膠原纖維、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維,我們僅簡(jiǎn)述這三種纖維的常見(jiàn)染色方法。
(1)Mallory三色染色法:常用于判定多種組織、器官的病變程度及修復(fù)情況,區(qū)分腫瘤組織中的纖維成分與平滑肌。
染色步驟:
①中性甲醛液固定組織,石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水。
②重鉻酸鉀液10min。
③蒸餾水沖洗2min,蒸餾水2次。
④酸性復(fù)紅液2min,蒸餾水稍洗。
⑤苯胺藍(lán)液20min,95%乙醇快速分化。
⑥直接用無(wú)水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹(shù)膠封固。
結(jié)果判定:膠原和網(wǎng)狀纖維呈藍(lán)色。
(2)Van Gieson苦味酸酸性復(fù)紅法:可以顯示組織、器官的損傷、修復(fù)及硬化情況,特別是用于鑒別腫瘤組織中的膠原纖維與平滑肌纖維,可為診斷提供重要依據(jù)。
染色步驟:
①組織切片按常規(guī)脫蠟水洗。
②用Weigert蘇木素液染細(xì)胞核5~l0 min。
③自來(lái)水充分洗滌數(shù)分鐘。
④用顯微鏡檢查細(xì)胞核的著色程度,過(guò)深可用0.5%鹽酸乙醇分化。
⑤自來(lái)水洗至變藍(lán);用蒸餾水洗。
⑥用Van Gieson液染1~5 min。
⑦傾去染液,直接用95%乙醇分化和脫水。
⑧無(wú)水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹(shù)膠封固。
結(jié)果判定: 膠原纖維呈深粉紅色,肌纖維、胞漿及紅細(xì)胞黃色,細(xì)胞核呈棕黑色或蘭黑色。

(3)網(wǎng)狀纖維染色-Wider染色法:可以用來(lái)顯示病變組織網(wǎng)狀支架的破壞情況。特別是在腫瘤病理診斷中,網(wǎng)狀纖維染色對(duì)于鑒別來(lái)源于上皮組織和間葉組織的惡性腫瘤具有重要價(jià)值。
染色步驟:
①組織切片脫蠟至水。
10%②磷鉬酸,2~5min。蒸餾水沖洗,5min。
1%③硝酸鈾,5s。蒸餾水沖洗,10s。
④氧化銀溶液,5~10min。
95%⑤乙醇速洗,1~2s。
⑥還原液還原,1~2s。蒸餾水沖洗,2min。
0.2%⑦氯化金調(diào)色,2~20s。蒸餾水沖洗,5min。
5%⑧次亞硫酸鈉,2min。蒸餾水沖洗,2min。
⑨核固紅染細(xì)胞核,5~10min。水稍洗。
⑩常規(guī)無(wú)水乙醇脫水、二甲苯透明、中性樹(shù)膠封固。
結(jié)果判定:網(wǎng)狀纖維呈黑色、細(xì)胞核呈紅色。

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